
糖水偏爱实验(sucrose preference test,SPT)是评价快感缺失的经典行为学检测实验,其原理是利用啮齿类动物对甜味的偏好而设计的一种检测方法,动物禁食一段时间后,同时给予白水和低浓度蔗糖水,以动物对蔗糖水的偏嗜度(糖水偏爱指数)为指标检测去判断动物是否出现快感缺失这一抑郁症状。1981年,Katz等首次在抑郁大鼠造模过程中发现,应激后的大鼠蔗糖和糖精水的消耗减少达50%,并进一步发现三环类抗抑郁药丙咪嗪可显著增加模型组大鼠糖水的消耗量。目前该实验多用于检测慢性不可预知应激后的快感缺失行为。
✦实验设备✦
赛昂斯SA226型糖水偏好实验系统,采用微量注射泵自动补水技术,可以准确测量大小鼠饮水量、饮食时间、饮水次数。每个水嘴前有位置传感器,只有当大小鼠进入饮水区域,缺少的水才是大小鼠真正喝掉的;大小鼠不在饮水区域,因自然挥发掉的水或者震动滴下的水都被软件自动去除。
「产品特点」
1、软件支持“一键换瓶”功能;
2、饮水检测模块化设计,方便位置交换;
3、采用微量注射泵精准补水,精度0.01ml;
4、高通量,最大支持200通道同时试验;
5、支持长时间试验,支持试验中途换水;
6、最大程度还原饲养笼环境,减少应激反应;
7、软件自动过滤液体挥发对试验数据的干扰;
8、饮水事件可通过TTL信号同步到第三方设备;
9、饮水时间精度0.01s,饮水量精度0.001ml;
10、每个笼盒并联到主机,任一通道故障不影响其他通道正常试验;
11、试验指标:单次饮水量、总饮水量、单次饮水时间、总饮水时间、饮水次数等。
✦实验流程✦
• 前期准备:选择成年雄性C57BL/6小鼠(8-10周龄),单笼饲养适应实验室环境1周。测试金属嘴导电性,确保舔水信号灵敏度(误触率<1%);预实验验证糖水与普通水瓶舔水次数基线(健康小鼠糖水偏好率>65%)。
• 适应期:动物需适应实验环境及双水瓶装置,通常12-24小时。
• 基线测试:记录正常状态下糖水偏好指数(糖水消耗量/总液体消耗量×100%)。
• 干预处理:如药品注射、慢性应激等,随后再次测量偏好指数。
• 最终测试:实验组腹腔注射氟西汀(10 mg/kg),对照组注射生理盐水;给药后禁食4小时(仅提供饮水);提供糖水与普通水瓶,连续记录24小时舔水次数;分析时段特异性数据(如给药后0-4小时 vs 4-24小时)。
评价指标:
糖水偏爱指数=蔗糖水饮用量/(蔗糖水饮用量+饮用水饮用量)x100%。
✦注意事项✦
(1)糖水偏爱实验对环境变化非常敏感,是影响实验成功与否的关键因素,检测应在独立房间进行,保持环境安静,且实验期间保持温度湿度适宜。
(2)基线测试阶段,对于多次训练但基线仍不稳定,或饮水量过多或过少的动物需剔除。
✦讨论和小结✦
糖水偏爱实验可以评价抑郁模型动物是否出现人类抑郁症核心症状--快感缺失,具有较高的可信度。糖水偏爱实验用于抑郁行为评价的方法小结如下:
1.饮水量的准确获取
关键因素是瓶嘴不自动向外滴水,只有动物舔舐时才出水,自然挥发掉的水或者震动滴下的水都要扣除。
2.实验模式
糖水偏爱实验分为蔗糖饮水训练、基线测定、根据基线分组、抑郁模型复制和药物处理蔗糖饮水测试几部分。该实验在慢性应激模型中应用最广泛,一般应激4~5周,型动物水偏爱指数出现显著降低。此外,该实验为抗抑郁药物起效速率研究的最主要行为学检测方法,因此在药物处理阶段可进行周期性检测。
3.判断指标
糖水偏爱指数为主要的评价指标,抑郁行为判断标准:糖水偏爱指数低于0.4或者与对照组相比有显著性减低。空白对照组大鼠的糖水偏爱指数大于80%,空白对照组小鼠的糖水偏爱指数大于70%。
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