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斑马鱼水龙头测试
斑马鱼中由水龙头诱发的惊吓反应是一种可靠且易于接受的神经行为评估,用于进行毒理学和药理学研究(Eddins 等人,2010 年)。该测试能够确定与肌肉功能和疾病相关的游泳活动的影响(Lebold等人,2013年,Sztal等人,2016年)和短期记忆的改变(Levin和Cerutti,2009年)。
该设备通常由一个 2 x 4 的腔室阵列组成,具有不透明的分隔,以防止不同罐之间的视觉接触。可以同时测试八条鱼,每个水箱中测试一条鱼。建议在水箱下方放置一个自动电磁阀,以产生水龙头。应使用额外的自动化系统来控制抽头次数和试验块之间的时间。此外,连接到跟踪软件的摄像机可用于记录游泳行为。
实验方案需要对测试室和试验室进行初步适应。随后评估基线反应和习惯性,以紧密间隔或多次穿刺。测试试验在设定的时间点进行,其时间点取决于研究的目的。可以研究对单次或多次抽头的响应。
斑马鱼的使用可以对暴露于有毒物质(如酒精(Carvan等人,2004))或神经系统疾病以及药物筛选引起的神经发育缺陷进行高通量研究。与研究中常用的哺乳动物相比,斑马鱼具有易于繁殖、发育快、实验成本低等优点。
优势
自来水诱发游泳测试可实现毒理学和药理学研究,包括发育评估以及肌肉功能和短期记忆测试(Levin和Cerutti,2009年,Sztal等人,2016年)。也可以比较不同的遗传背景或研究遗传操作的影响。
斑马鱼的使用能够研究具有光学清晰度的神经发育过程,同时作为脊椎动物提供卓越的外推。与哺乳动物相比,该模型增加了实验吞吐量,同时降低了实验成本,因为鱼类很容易大量繁殖并且不需要很大的住房空间。此外,发育非常快,因为在受精后 24 小时观察到自发肌肉收缩,而在受精后 48 小时表现出受控的游泳行为(Sztal 等人,2016 年)
局限性
在研究通过浸泡输送的斑马鱼中的药物效果时应谨慎,因为已经提出了有关翻译有效性的水溶性和药代动力学问题(Bailey等人,2015)。
此外,在评估记忆改变的研究中,斑马鱼的神经行为研究无法阐明离散的中枢神经系统区域的作用,尽管斑马鱼大脑中存在的结构似乎在生化和功能上与哺乳动物大脑相似,以允许神经药理学操作(Bailey 等人,2015 年)。应特别注意实验设计,以便明确报告的差异是由认知变化还是运动效应引起的(Bailey et al., 2015)。
对自来水诱发游泳测试的数据分析通常包括游泳距离的比较(Eddins 等人,2010 年)。结果可以显示为整个试验的变化(A),特定试验中(B)试验块期间或之后的游泳距离,或同一试验块(C)内的试验平均值。虽然距离单位通常为厘米/5秒(Eddins等人,2010),但也可以使用每分钟游动后的总距离(Lebold等人,2013)。结果显示为平均值的平均值±标准误差: